Zhang, Ying (2010) Molecular genetic approaches to the study of early sex determination in the Mediterranean fruit fly Ceratitis capitata. [Tesi di dottorato] (Unpublished)

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In Ceratitis capitata, noto dittero dannoso all’agricoltura, la determinazione del sesso è controllata da un gene chiave, Cctransformer (Cctra) che durante l’embriogenesi è attivo negli embrioni XX e viene spento a 8-10 ore negli XY grazie all’attività del fattore M Y-linked, determinante la mascolinità. Il gene Cctra negli embrioni XX codifica una proteina che regola lo splicing dei pre-mRNA sia del medesimo Cctra, che di Ccdoublesex e Ccfruitless, (Ccdsx di Ccfru). Negli embrioni XY i trascritti maschio-specifici di Cctra codificano per una proteina tronca non funzionale, e Ccdsx e Ccfru, producono trascritti alternativi, codificanti isoforme proteiche maschio-specifiche, che agiscono come fattori trascrizionali di geni bersaglio coinvolti nel controllo del differenziamento sessuale visibile a stadio adulto della mosca. In Drosophila melanogaster il differente segnale primario per la determinazione del sesso, che consiste nel numero di cromosomi X (2X nelle femmine e un X nei maschi) agisce invece sul gene Sex-lethal, che a sua volta agisce sul gene transformer, il quale controlla lo splicing dei geni doublesex e fruitless. La cascata regolativa di Drosophila è quindi parzialmente conservata in Ceratitis. Il progetto di tesi di dottorato è stato focalizzato sulla identificazione di geni di Ceratitis che abbiano espressione maschio-specifica o maggiore nei maschi XY a stadi embrionali precoci dello sviluppo. Questo studio sperimentale è stato condotto al fine di identificare il gene M Y-linked e chiarire quindi come funziona l’inizio della determinazione del sesso in Ceratitis, ma anche al fine di isolare altri geni che collaborino con M, o che siano regolati da M, durante l’embriogenesi delgi XY. Abbiamo identificato il primo gene Y-linked in Ceratitis che risulta essere trascrizionalmente attivo a stadi precoci dell’embriogenesi (1-2 ore dalla ovodeposizione) e ne abbiamo iniziato a studiare le regioni promotrici. Abbiamo condotto esperimenti di sottrazione molecolare e in tal modo abbiamo identificato 11 geni di Ceratitis che risultano maggiormente espressi in embrioni XY rispetto agli XX ad 8-10 dalla ovodeposizione.

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